逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)同時(shí)檢測(cè)水中多種腸道病毒
| 論文類(lèi)型 | 基礎(chǔ)研究 | 發(fā)表日期 | 2007-02-01 |
| 來(lái)源 | 環(huán)境科學(xué)研究 | ||
| 作者 | 張崇淼,劉永軍,王曉昌,薛小平 | ||
| 關(guān)鍵詞 | 腸道病毒 逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR) 通用引物 同時(shí)檢測(cè) 水 | ||
| 摘要 | 建立了一種利用通用引物RT- PCR 技術(shù)檢測(cè)水中腸道病毒的方法.利用脊髓灰質(zhì)炎病毒1～3 型,柯薩奇病毒B3型作為參考病毒株,根據(jù)腸道病毒RNA5′非編碼區(qū)中具有高度同源性的序列來(lái)設(shè)計(jì)通用引物. 比較了M- MLV 酶和AMV 酶的逆轉(zhuǎn)錄效果,AMV 酶能夠成功地從地表水和生活污水中逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA ,更適于實(shí)際應(yīng)用. 對(duì)比研究了PCR 過(guò)程中的退火溫度,c (Mg2 + ) 等因素對(duì)RT- PCR 檢測(cè)結(jié)果的影響,選擇退火溫度55 ℃, c (Mg2 + ) 為2mmolPL的反應(yīng)條件,優(yōu)化了RT - | ||
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