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雙水相萃取與疏水層析分離基因工程人溶菌酶

論文類型 基礎(chǔ)研究 發(fā)表日期 2008-03-01
來源 華東理工大學(xué)學(xué)報(bào)
作者 張亞杰,夏杰,陸兵,徐殿勝
關(guān)鍵詞 雙水相萃取 疏水層析 畢赤酵母
摘要 采用雙水相萃取與疏水層析分離純化重組巴氏畢赤酵母表達(dá)的基因工程人溶菌酶。通過正交實(shí)驗(yàn)方法研究了聚合物濃度、鹽濃度和p H 對(duì)雙水相體系萃取人溶菌酶過程的影響。結(jié)果表明:當(dāng)雙水相萃取的p H 為4 ,硫酸鈉、氯化鈉、PEG4000 的質(zhì)量濃度為0. 13 、0. 06 和0. 08 時(shí),人溶菌酶上相回收率達(dá)98. 8 %,純化因子18. 0 ,濃縮因子3. 6 。雙水相萃取后選用高效疏水層析色譜純化人溶菌酶,經(jīng)苯基高取代基介質(zhì)疏水層析后得到純化因子為22. 7 ,收率為88. 4 %的人溶菌酶純化產(chǎn)品,電泳

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