菌B49乙醛乙醇脫氫酶基因克隆中的引物設(shè)計(jì)
| 論文類型 | 基礎(chǔ)研究 | 發(fā)表日期 | 2008-06-01 |
| 來(lái)源 | 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) | ||
| 作者 | 林海龍,任南琪,鄭國(guó)香,張坤,段志潔 | ||
| 關(guān)鍵詞 | 乙醛乙醇脫氫酶基因; clustalw;生物制氫細(xì)菌;簡(jiǎn)并引物 | ||
| 摘要 | 為研究乙醛乙醇脫氫酶基因及其在乙醇發(fā)酵生物制氫中的重要作用,采用clustalw對(duì)12個(gè)菌種的乙醛乙醇脫氫酶蛋白質(zhì)序列進(jìn)行多重比對(duì)分析,共得到6個(gè)保守區(qū),以這6個(gè)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物,共選用9對(duì)簡(jiǎn)并引物,命名為ADHJ1 、ADHJ2、ADHJ3、ADHJ4、ADHJ5、ADHJ6、ADHJ7、ADHJ8、ADHJ9. 用這9對(duì)引物對(duì)B49總DNA進(jìn)行簡(jiǎn)并PCR,共有兩對(duì)引物的擴(kuò)增得到預(yù)期的結(jié)果. 其PCR產(chǎn)物經(jīng)pMD18 - T克隆轉(zhuǎn)化至大腸桿菌DH5α中,經(jīng)篩選后測(cè)序. 結(jié)果表明,這兩段DNA推導(dǎo)的氨基酸序 | ||
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