免疫磁珠分離與實(shí)時(shí)定量PCR 技術(shù)聯(lián)合檢測(cè)水中輪狀病毒的研究
論文類型 | 基礎(chǔ)研究 | 發(fā)表日期 | 2009-05-01 |
來源 | 環(huán) 境 科 學(xué) | ||
作者 | 楊萬,,何苗,,李丹,,施漢昌,,劉麗 | ||
關(guān)鍵詞 | 免疫磁珠分離前處理; 實(shí)時(shí)定量PCR; 輪狀病毒; 環(huán)境水樣 | ||
摘要 | 建立了一種免疫磁珠分離技術(shù)聯(lián)合實(shí)時(shí)定量PCR 快速定量檢測(cè)水中輪狀病毒的方法. 通過制備能夠分離水中輪狀病毒的特異免疫磁珠, 優(yōu)化分離條件, 建立了免疫磁珠分離前處理方法, 并與逆轉(zhuǎn)錄、實(shí)時(shí)定量PCR 結(jié)合, 成功用于水中輪狀病毒的檢測(cè). 研究發(fā)現(xiàn), 在1 mL 水樣中加入10 uL 輪狀病毒免疫磁珠、0.25 uL Tween 20、孵育2 h 可達(dá)到較好的分離效果; 免疫磁珠可用于3%牛肉浸膏等常用病毒洗脫液中的輪狀病毒的分離, 表明該分離技術(shù)能與已有的病毒濃集方法良好地整合. 免疫磁珠分離技術(shù)與 |
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